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固相萃取装置在质膜磷脂酰

时间:2020-04-18   浏览:64  

激酶 !(@B3A?67 C67"D? !,&I!)移位到质膜, ,-.固相萃取装置在质膜磷脂酰丝氨酸(&E)的配合下将 &I!激活,形成有 活性的 &I!。胞外刺激消失后, ,-.与 &I!分离而使酶钝化为无活性形式。 ++蛋白激酶 !属 E?B = FGB蛋白激酶,广泛存在于各组织。 &I!均为单链多肽(相对分子质量 *; ;;; J); ;;;),其 K端为调节域,包括结合 ,-.、!"# $的部位和 &E作用部位,还含有产生自身抑制的“假底物模 体”,!端为激酶催化域。 &I!激活可使大量底物蛋白磷酸化而产生广泛的生理效应(图 () *)。 ++(()&I!对细胞代谢、功能的调节作用 + &I!的靶蛋白很多,包括代谢途径关键酶,如糖原合酶;细 胞骨架蛋白,如肌钙蛋白、微管结合蛋白等;膜载体、通道蛋白,如 K" $ I$ -F&酶等;信号转导蛋白,如 L"M蛋白、 .F&酶激活蛋白(.F&"D? "0A6N"A67O @B3A?67,.-&)等;膜受体,如表皮生长因子受体、肾上腺素 ! 受体等。 ++(#)&I!对基因表达的调控 + &I!活化后可转移到胞核,磷酸化调节某些癌基因编码的转录因子, 促进细胞增殖。 !促进立早基因表达,引起初期应答。 &I!磷酸化激活核中血清反应因子( ELP),它可 结合于基因调节区的血清反应元件(ELH),增加转录因子 !"#、$%&、’()等基因的表达。这些基因因其产物 第十九章 =细胞信号转导!"! 出现早,寿命短而被称为立早基因(!"""#$!%&# #%’() *#+#)。!促进转录因子 !"#、$%&磷酸化。磷酸化 的 $%&和 !"#组合形成二聚体的转录激活因子(如 ,-.)。后者可促进相关基因的转录与表达,完成细 胞生长、分裂的次级应答。 "核因子 /0!1是异二聚体转录因子,可穿梭于胞质和胞核,在胞质中被抑制 蛋白 2!1结合而受到抑制。 -34使 2!1磷酸化脱离 /0!1,活化的 /0!1则进入细胞核促进相应基因的转 录表达(图 .5 5)。佛波酯( 678’98( #:&#’)是一种化学致

 

癌剂,因佛波酯可模拟 ;,<结合并持续激活 -34,导致细胞异常生长、分裂而致癌。 图 。5 5= -34对基因表达的调控机制 >?0:血清反应因子; >?@:血清反应元件 = A?@:甲状腺激素反应元件 =,-。:二聚体 ;/,结合蛋白 = /0!1:核因子 !1 三、生长因子、细胞因子信号转导途径 ==生长因子和细胞因子是细胞分泌的蛋白质、多肽类信号分子,能诱导特异核转录因子合成,进而促进 与细胞分裂周期、 ;/,复制等相关酶的表达,调节细胞生长和增殖。生长因子通过受体酪氨酸蛋白激酶 (A-3)转导信号而发挥作用。某些诱导分裂的细胞因子则通过非受体 A-3传递信号。近年发现,生长因 子、细胞因子、癌基因产物等的信号转导途径的调节与细胞的分化与增殖密切相关,调节的异常经常引起 肿瘤的发生,是现代生物医学研究的热点之一。 ==(一)酪氨酸蛋白激酶 ==可被生长因子与细胞因子等信号分子结合的靶细胞膜上的受体有两种,一是受体型酪氨酸蛋白激酶, 当信号分子与此受体结合后,此受体的 A-3活性被激活,从而发生一系列相应的级联反应。二是非 A-3 受体,此种受体无 A-3活性,但可借助细胞内一类具有 A-3活性的连接物蛋白完成信号转导。这些信号 蛋白也称为非受体型酪氨酸蛋白激酶。非受体型酪氨酸蛋白激酶对于上述两种受体途径均有重要的 作用。 ==非受体型酪氨酸蛋白激酶广泛存在于各组织细胞的胞质或胞内颗粒中,可根据其亚细胞定位和组织 特异性分为 B个家族,如 C%D及 >’E家族。 >’E为典型的非受体 A-3,它包含 F种重要的同源结构域。 # A-3活性域(又称 >’E同源序列 。,>’E 78"8(8*) $8"%!+ 。,>G。),它可

 

催化靶蛋白 A)’残基磷酸化; !>GH 结构域,约由 .II个氨基酸组成,可通过两个独立的序列识别与其结合的蛋白质中磷酸化的 A)’及其羧基 侧的几个氨基酸序列; ">GF结构域,约含 JI个氨基酸,能与富含脯氨酸( -’8)残基和疏水区的特异肽段 相结合。很多信号转导蛋白就是通过上述特殊结构域间的结合来参与信号转导过程的。 #"!第四篇!综!合!篇 !!(二)受体型 "#$ %&’ ()#$信号转导途径 !!现以表皮生长因子( *+,-*./&0 1.2345 6&742.,89:)为例,讨论各种生长因子胞外信号从质膜到胞核的 受体型 "#$ %&’ ()#$信号转导途径。 ! !;<生长因子受体的活化 ! ! 89:能刺激表皮细胞、上皮细胞生长。89:与靶细胞表面无活性 89:受体( 89:%)胞外配体结合部 位结合,引起受体变构、二聚化。并激活受体胞内区 "#$活性,二聚化使受体间互相接近,一受体 "#$对 另一受体的 "=.残基发生交互磷酸化。在此活化的受体中,自身催化生成的磷酸化 "=.肽段便成为多种 含 >?@域信号蛋白的停泊位点(-27A,B1 ’,4*),进而激活下游的信号。 ! !@<小 9蛋白 %&’的激活 !!胞质内信号蛋白 9.C@( 9.2345 6&742. .*7*+42. C,B-,B1 +.24*,B@)为含 >?@和 >?D域的连接物蛋白。 9.C@的 >?@域识别、结合活化的生长因子受体中磷酸化的

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